أختبار الأوزازون للسكريات Osazone Test
- المركبات التى تحتوى على المجموعة (CO-CHOH-) عند تسخينها مع الفينيل هيدرازين phenyl hydrazine تكون مركبات أوزازون بللورية.
- بلورات الأوزازون المتكونة لها شكل بللوري معين تحت الميكروسكوب الضوئي، وبمعرفة هذا الشكل البللوري يمكن معرفة نوع السكر الموجود.
- يتم التفاعل على خطوتين :
الأولي: يتفاعل الفينيل هيدرازين مع مجموعة الكربونيل للسكر ويكون الفينيل هيدرازون.
الثانية: يتفاعل الفينيل هيدرازون مع جزئيين من الفينيل هيدرازين ليكون الأوزازون.
- زمن تكون البللورات والترسيب الذى يحدث على البارد أو الساخن يساعد فى التعرف على نوع الكربوهيدرات (السكر).
طريقة الأختبار:
(1) في أنبوية أختبار أضف 3 مل من محلول السكر إلى 5 قطرات من حمصض الخليك الثلجي.
(2) أضف 1 مل من محلول الفينيل هيدرازين phenyl hydrazine و 1 مل من محلول إسيتات الصوديوم.
(3) قلب المكونات السابقة جداً
(4) ضع الأنبوبة بمحتوياتها فى حمام مائي مغلي boiling water bath
النتائج:
- الأوزازون للسكريات الأحادية (الجلوكوز - الفركتوز - المانوز) تتكون على الساخن بعد 15 دقيقة وهي عبارة عن إبر needles لها نفس التركيب البللورى تحت الميكروسكوب.
- الأوزازون للسكريات المختزلة مثل المالاتوز واللاكتوز يتكون بعد أكثر من 30 دقيقة وتظهر البللورات ببطء بعد التبريد ويمكن تمييزها عن طريق الميكروسكوب كالتالي:
اللاكتوز: عبارة عن بلورات على هيئة خصلة من الإبر a tuft of needles
المالاتوز: عبارة عن بلورات على هيئة إبر عريضة broad needles
لماذا لا يمكن التمييز بين الجلوكوز والفركتوز والمانوز باستخدام كاشف الأوزازون
لأنه فى حالة D- Fructose ، D-Mannose ، D-Glucose تعطي الأوزازون نفسه وذلك لتشابه الجزء الذي لا يدخل في التفاعل في كل من السكريات الثلاثة. (توزيع H , OH على الكربونات C3,C4,C5 يكون واحد ولا يتغير )
