تحضير الكواشف المستخدمة للكشف عن السكريات
(1) طريقة تحضير كاشف كوليش Molish reagent
يتم تحضير كاشف موليش بواسطة الكيمياويات التالية:
ألفا - نافتول 14,5 جم.
- كحول الإيثانول (سبيرتو) 1000 مل تقريباً.
- يذاب 14,5 جم من ألفا - نافتول في كمية من السبيرتو ثم يكمل الحجم النهائي بوساطة السبيرتو إلى الليتر.
- حيث إنه يعطي مع السكريات وبوجود حمض الكبريتيك لون أحمر بنفسجي.
(2) تحضير كاشف بارفويد Barfoed reagent
- المواد الكيميائية اللازمة لتحضير كاشف بارفويد هي:
- يذاب 66.5 جم من خلات النحاس في كمية من الماء المقطر ثم يضاف إلى المحلول الناتج 9 مل من حمض الخليك الثلجي ويكمل الحجم النهائي بواسطة الماء المقطر حتى الوصول إلى 1000 مل.
(3) تحضير كاشف سيليفانوف Seliwanoff reagent
- هناك طريقتان لتحضير كاشف سيليفانوف Seliwanoff reagent كما يلي:
الطريقة الأولى
- يتم تحضير الكاشف عن طريق المواد الآتية:
- ريزورسینول 0,5 جم.
- حمض الهيدروكلوريك المركز 330 مل.
- ماء مقطر 1000 مل تقريباً.
- يذاب 0,5 جم من الريزوسينول في كمية من الماء المقطر.
- ثم يضاف إلى المحلول الناتج 330 مل من حمض الهيدروكلوريك المركز.
- يكمل بعد ذلك الحجم بواسطة الماء المقطر إلى الليتر.
الطريقة الثانية
- يتم تحضير الكاشف بهذه الطريقة بواسطة المواد الآتية:
- ریزورسینول 20 جم
- حمض الكبريتيك النقي 5 مل
- ماء مقطر 1000 مل تقريباً
- يذاب 20 جم من الريزورسينول في كمية من الماء المقطر.
- ثم يضاف إلى المحلول المتشكل 5 مل من حمض الكبريتيك الطبي (النقي جداً).
- يكمل الحجم بواسطة الماء المقطر إلى الليتر.
حيث يعطي هذا الكاشف مع السكريات المرجعة الكيتونية (الفركتوز) لوناً أحمر ولا يعطي مع السكريات الألدهيدية أي لون.
(4) تحضير كاشف فهلنج Fehling reagent
يتألف هذا الكاشف من محلولين كما يلي:
تحضير محلول فهلنج (أ) أو محلول فهلنج (A)
- يتكون من المواد الآتية:
كبريتات النحاس : 35 جم
حمض الكبريتيك : 5 مل
- ماء مقطر : 1000 مل تقريباً.
- يذاب 35 جم من كبريتات النحاس في كمية من الماء المقطر.
- ثم يضاف إلى المحلول الناتج 5 مل من حمض الكبريتيك.
- بعد ذلك يكمل الحجم بواسطة الماء المقطر إلى الليتر.
- وهكذا نكون قد حصلنا على محلول فهلنغ A.
تحضير محلول فهلنج (ب) أو محلول فهلنج (B)
يتكون من المواد الآتية:
- يذاب 173 جم من ملح روشيل في الماء المقطر ويذاب معه أيضاً 125 جم من هيدروكسيد الصوديوم.
- ثم يكمل الحجم بواسطة الماء المقطر إلى الليتر
- هكذا نكون قد حصلنا على محلول فهلنج (B).
- عند الاستعمال يؤخذ عادة حجمان متساويان من محلول فهلنج (أ) ومحلول فهلنج (ب) ويمز جان معاً ثم يستعملان في الاختبارات المطلوبة .
- يعطي محلول فهلنغ اختبار إيجابي مع السكريات المختزلة وبالتسخين راسباً أحمر.